產(chǎn)地 | 中國(guó)/美國(guó) |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號(hào) | kl-CC337749 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | BV2 |
保質(zhì)期 | 12個(gè)月個(gè)月 |
BV2小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
BV2小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用什么培養(yǎng)基凍存時(shí)就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時(shí),-20 度兩小時(shí),-70度過(guò)夜,再放液氮長(zhǎng)期保存。
BV2小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況。若細(xì)胞密度較高,及時(shí)傳代;否則,及時(shí)更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
BV2小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請(qǐng)一定要注意安全,尤其是來(lái)自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時(shí)若有液氮進(jìn)入,請(qǐng)一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時(shí)爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類(lèi),若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)可以暫時(shí)不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
PLC/PRF/5 KL1098 人肺癌亞歷山大細(xì)胞系 PLC/PRF/5細(xì)胞
MSTO-211H KL1099 人肺癌細(xì)胞株 MSTO-211H細(xì)胞
Calu-6 KL1100 人肺癌細(xì)胞系(未分化)Calu-6細(xì)胞
Tul-1 KL1101 人肺癌細(xì)胞系 Tul-1細(xì)胞
NCI-H292 KL1102 人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移) NCI-H292細(xì)胞
PC9 KL1103 人肺癌細(xì)胞,PC9細(xì)胞
PC9-EGFP-puro KL1104 人肺癌細(xì)胞,PC9-EGFP-puro細(xì)胞
PC14 KL1105 人肺癌細(xì)胞,PC14細(xì)胞
NCI-H1975 KL1106 人肺癌細(xì)胞,NCI-H1975細(xì)胞
JRDC050 KL1107 人肺癌細(xì)胞,LECPα-1細(xì)胞, LECPα-1
Human A549 KL1108 人肺癌細(xì)胞,Human A549細(xì)胞
H125 KL1109 人肺癌細(xì)胞,H125細(xì)胞
Calu-1 KL1110 人肺癌細(xì)胞,Calu-1細(xì)胞
A549 KL1111 人肺癌細(xì)胞,A549細(xì)胞
A549-EGFP-puro KL1112 人肺癌細(xì)胞,A549-EGFP-puro細(xì)胞
A-427 KL1113 人肺癌細(xì)胞,A-427細(xì)胞
973 KL1114 人肺癌細(xì)胞,973細(xì)胞
CHMAS KL1115 人肥大細(xì)胞白血病細(xì)胞,CHMAS細(xì)胞
Tsu-Pr1 KL1116 人非雄激素依賴型前列腺癌細(xì)胞,Tsu-Pr1細(xì)胞
NCI-H2087 KL1117 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞,NCI-H2087細(xì)胞
NCI-H1975 KL1118 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞,NCI-H1975細(xì)胞
NCI-H157 KL1119 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞,NCI-H157細(xì)胞
NCI-H838 KL1120 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,NCI-H838細(xì)胞
NCI-H23 KL1121 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,NCI-H23細(xì)胞
NCIH1650-M3 KL1122 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,NCIH1650-M3細(xì)胞
NCIH1299 KL1123 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,NCIH1299細(xì)胞
HCC827 KL1124 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,HCC827細(xì)胞
H322 KL1125 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,H322細(xì)胞
A549 KL1126 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,A549細(xì)胞
SW-1573 KL1127 人非小細(xì)胞肺癌 SW-1573細(xì)胞
H1299 KL1128 人非小細(xì)胞肺癌 H1299細(xì)胞