產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號 | kl-CC337876 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | HCEC |
保質(zhì)期 | 12個月個月 |
HCEC角膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
HCEC角膜上皮細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時用什么培養(yǎng)基凍存時就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時,-20 度兩小時,-70度過夜,再放液氮長期保存。
HCEC角膜上皮細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時搖動,使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時傳代;否則,及時更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
HCEC角膜上皮細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時若有液氮進(jìn)入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時可以暫時不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
HOC1 KL0833 人卵巢癌細(xì)胞,HOC1細(xì)胞
HO-8910 KL0834 人卵巢癌細(xì)胞,HO-8910細(xì)胞
EFO-27 KL0835 人卵巢癌細(xì)胞,EFO-27細(xì)胞
EFO-21 KL0836 人卵巢癌細(xì)胞,EFO-21細(xì)胞
COV644 KL0837 人卵巢癌細(xì)胞,COV644細(xì)胞
COV504 KL0838 人卵巢癌細(xì)胞,COV504細(xì)胞
COV434 KL0839 人卵巢癌細(xì)胞,COV434細(xì)胞
COV362 KL0840 人卵巢癌細(xì)胞,COV362細(xì)胞
COLO720E KL0841 人卵巢癌細(xì)胞,COLO720E細(xì)胞
COLO-704 KL0842 人卵巢癌細(xì)胞,COLO-704細(xì)胞
COC1 KL0843 人卵巢癌細(xì)胞,COC1細(xì)胞
CaOV3 KL0844 人卵巢癌細(xì)胞,CaOV3細(xì)胞
A2780 KL0845 人卵巢癌細(xì)胞,A2780細(xì)胞
8910PM KL0846 人卵巢癌細(xì)胞,8910PM細(xì)胞
3AO KL0847 人卵巢癌細(xì)胞,3AO細(xì)胞
COC1/CDDP KL0848 人卵巢癌順鉑耐藥株 COC1/CDDP細(xì)胞
CRIC043 KL0849 人卵巢癌 C200細(xì)胞, C200
FD6 KL0850 人淋巴細(xì)胞與倉鼠肺細(xì)胞雜交細(xì)胞,FD6細(xì)胞
FD4 KL0851 人淋巴細(xì)胞與倉鼠肺細(xì)胞雜交細(xì)胞,FD4細(xì)胞
JK(Jurkat) KL0852 人淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞,JK(Jurkat)細(xì)胞
T2(174×CEM.T2) KL0853 人淋巴母細(xì)胞,T2(174×CEM.T2)細(xì)胞
CA46 KL0854 人淋巴瘤細(xì)胞,CA46細(xì)胞
H293T KL0855 人類胚胎*表皮細(xì)胞,H293T細(xì)胞
KB KL0856 人口腔上皮癌細(xì)胞,KB細(xì)胞
KB/V KL0857 人口腔上皮癌長春新堿耐藥株 KB/V細(xì)胞
JRDC033 KL0858 人口腔表皮樣癌細(xì)胞,KB細(xì)胞, KB
KB KL0859 人口腔表皮樣癌 KB細(xì)胞
HB KL0860 人口腔癌細(xì)胞,HB細(xì)胞
801-D KL0861 人巨細(xì)胞性肺癌細(xì)胞,801-D細(xì)胞
Mo7e KL0862 人巨細(xì)胞白血病細(xì)胞株 Mo7e細(xì)胞
Dami KL0863 人巨核細(xì)胞保白血病細(xì)胞,Dami細(xì)胞
JRDC074 KL0864 人晶狀體上皮細(xì)胞,HLEC細(xì)胞, HLEC