產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進口品牌 |
貨號 | kl-CC337928 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | 3T3-L1 |
保質(zhì)期 | 12個月個月 |
3T3-L1小鼠胚胎成纖維細胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細胞生長:貼壁生長
細胞形態(tài):上皮樣;多角形
細胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
3T3-L1小鼠胚胎成纖維細胞凍存步驟:我們實驗室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細胞時用什么培養(yǎng)基凍存時就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細胞是加血清中止
⑷ 離心收集細胞,不同細胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細胞,懸浮細胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細胞,移到凍存管,放4度半小時,-20 度兩小時,-70度過夜,再放液氮長期保存。
3T3-L1小鼠胚胎成纖維細胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內(nèi);
2 戴上護目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時搖動,使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細胞密度較高,及時傳代;否則,及時更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
3T3-L1小鼠胚胎成纖維細胞復(fù)蘇注意事項如下:
A.復(fù)蘇細胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時若有液氮進入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時爆炸。
B. 細胞復(fù)蘇時需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒炐枰仨氂兴煌?,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應(yīng)后,方進行實驗。
C. 細胞復(fù)蘇時可以暫時不使用抗生素(G418等),以利于細胞的恢復(fù)。
D.細胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
HUVEC[HUV-EC-C] KL0729 人臍靜脈內(nèi)皮細胞,HUVEC細胞
HUVE-12/CRL2480 KL0730 人臍靜脈內(nèi)皮細胞,HUVE-12/CRL2480細胞
LGZC013 KL0731 人臍靜脈內(nèi)皮細胞,ECV304細胞, ECV304
ECV304 KL0732 人臍靜脈內(nèi)皮細胞,ECV304細胞
ECV-304 KL0733 人臍靜脈內(nèi)皮 (具有T24細胞特性) ECV-304細胞
UM KL0734 人葡萄膜黑色素細胞,UM細胞
Malmc KL0735 人皮膚纖維微細胞系 Malmc細胞
A431 KL0736 人皮膚鱗癌細胞,A431細胞
SK-MEL-1 KL0737 人皮膚黑色素瘤細胞,SK-MEL-1細胞
BJ KL0738 人皮膚成纖維細胞系 BJ細胞
HSF KL0739 人皮膚成纖維細胞,HSF細胞
Hs 865.Sk KL0740 人皮膚成纖維細胞,Hs 865.Sk細胞
CCC-HSF-1 KL0741 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
HS-4 KL0742 人皮膚癌細胞系 HS-4細胞
HS-1 KL0743 人皮膚癌細胞系 HS-1細胞
Hut102 KL0744 人皮膚T細胞淋巴瘤 Hut102細胞
HEF KL0745 人胚纖維細胞系 HEF細胞
CCC-HPE-2 KL0746 人胚胎*組織來源細胞,CCC-HPE-2細胞
HFSF KL0747 人胚胎眼鞏膜成纖維細胞,HFSF細胞
HFTF KL0748 人胚胎眼Tenon's囊成纖維細胞,HFTF細胞
CCC-HIE-2 KL0749 人胚胎腸粘膜細胞,CCC-HIE-2細胞
293LVT KL0750 人胚腎細胞--用于慢病毒包裝 293LVT細胞
FIP293 KL0751 人胚腎細胞(亞系克?。〧IP293細胞
AD293 KL0752 人胚腎細胞,AD293細胞
AAV-293 KL0753 人胚腎細胞,AAV-293細胞
2V6.11 KL0754 人胚腎細胞,2V6.11細胞
293 KL0755 人胚腎細胞,293細胞
293XL-hTLR9 KL0756 人胚腎細胞,293XL-hTLR9細胞
293TN KL0757 人胚腎細胞,293TN細胞
293-mTLR5 KL0758 人胚腎細胞,293-mTLR5細胞
293-L.P. KL0759 人胚腎細胞,293-L.P.細胞
293FT KL0760 人胚腎細胞,293FT細胞
293ebna KL0761 人胚腎細胞,293ebna細胞
293A KL0762 人胚腎細胞,293A細胞
293 Cells, low passage KL0763 人胚腎細胞,293 Cells, low passage細胞