產(chǎn)地 | 中國/美國 |
品牌 | KALANG/進(jìn)口品牌 |
貨號 | kl-CC338026 |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
英文名稱 | CEF |
保質(zhì)期 | 12個月個月 |
CEF雞胚成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞生長:貼壁生長
細(xì)胞形態(tài):上皮樣;多角形
細(xì)胞傳代:1:2-1:4傳代;每周2-3次
CEF雞胚成纖維細(xì)胞凍存步驟:我們實(shí)驗(yàn)室是按1:3:6 配凍存液1份甘油3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時用什么培養(yǎng)基凍存時就用什么培養(yǎng)基):
⑴ 吸出舊培養(yǎng)液加PBS沖洗一次
⑵ 胰酶消化
⑶ 加培養(yǎng)基中止消化,有的細(xì)胞是加血清中止
⑷ 離心收集細(xì)胞,不同細(xì)胞離心率不一樣(以上僅為貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞收集就用第四部)
⑸ 吸出離心管上清液,加1ML 的凍存液重懸細(xì)胞,移到凍存管,放4度半小時,-20 度兩小時,-70度過夜,再放液氮長期保存。
CEF雞胚成纖維細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟如下:
1 將培養(yǎng)基置于37℃回溫,回溫后將其用75%酒精擦拭,移入無菌操作臺內(nèi);
2 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套之后,從液氮罐中取出細(xì)胞冷凍管。若凍存管內(nèi)有液氮進(jìn)入,需擰松凍存管,排出內(nèi)部殘留的液氮,之后擰緊凍存管,放入37-40℃水浴中,并不時搖動,使其迅速融化,以足量75%酒精擦拭之,轉(zhuǎn)移到已加入10ml培養(yǎng)液的離心管內(nèi);
3 在1,000 rpm下離心5~10分鐘,棄去上清液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,置 5% CO2溫箱靜置培養(yǎng);
4 次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng),觀察生長情況。若細(xì)胞密度較高,及時傳代;否則,及時更換培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
CEF雞胚成纖維細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)如下:
A.復(fù)蘇細(xì)胞請一定要注意安全,尤其是來自客戶的細(xì)胞。在放入液氮容器之前就應(yīng)該檢查凍存管是否擰緊。取出復(fù)蘇時若有液氮進(jìn)入,請一定要擰松凍存管,排出液氮,防止溫度升高時爆炸。
B. 細(xì)胞復(fù)蘇時需使用指定培養(yǎng)液。絕大多數(shù)細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同的血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同,須以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
C. 細(xì)胞復(fù)蘇時可以暫時不使用抗生素(G418等),以利于細(xì)胞的恢復(fù)。
D.細(xì)胞復(fù)蘇前需檢查恒溫水浴鍋的溫度是否已經(jīng)適宜。
HTB-144 KL0331 胎盤絨毛癌細(xì)胞,JAR細(xì)胞 JAR
FBM KL0332 胎兒骨髓間充質(zhì)細(xì)胞,FBM細(xì)胞
KL0333 塔賓曲霉 ACCC 30165
TC-jcyj0144 KL0334 宋氏志賀氏菌
KL0335 斯氏油脂酵母 CICC 1715
KL0336 絲狀鏈霉菌 ATCC19753
KL0337 水螺菌 ATCC49643
MV.1.Lu KL0338 水貂肺上皮細(xì)胞,MV.1.Lu細(xì)胞
KL0339 樹狀微桿菌 ATCC4358
K6H6/B5 KL0340 鼠雜交骨髓瘤細(xì)胞,K6H6/B5細(xì)胞
L-MTK KL0341 鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞株 L-MTK細(xì)胞
C8-D1A KL0342 鼠小腦細(xì)胞,C8-D1A細(xì)胞
WEHI 164 KL0343 鼠纖維肉瘤細(xì)胞系 WEHI 164細(xì)胞
B82 KL0344 鼠細(xì)胞系 B82細(xì)胞
TC-jcyj0135 KL0345 鼠傷寒沙門氏菌
MA-782 KL0346 鼠乳腺癌細(xì)胞系 MA-782細(xì)胞
S-180-S2D9 KL0347 鼠肉瘤細(xì)胞,S-180-S2D9細(xì)胞
CRIC100 KL0348 鼠胚胎成纖維細(xì)胞,3T3-Swiss細(xì)胞, 3T3-Swiss
STO KL0349 鼠胚成纖維細(xì)胞系 STO細(xì)胞
3T3-E1 KL0350 鼠胚成骨細(xì)胞,3T3-E1細(xì)胞
PT67 KL0351 鼠逆轉(zhuǎn)錄酶病毒包裝細(xì)胞,PT67細(xì)胞
TC-jcyj0071 KL0352 鼠李糖乳桿菌
C2C12 KL0353 鼠肌原細(xì)胞,C2C12細(xì)胞
B16-Fo KL0354 鼠黑色素瘤細(xì)胞系 B16-Fo細(xì)胞
SP2/0-Ag14 KL0355 鼠骨髓瘤細(xì)胞,SP2/0-Ag14細(xì)胞
CRIC093 KL0356 鼠骨髓瘤 J558L細(xì)胞, J558L
HSC-T6 KL0357 鼠肝星形細(xì)胞,HSC-T6細(xì)胞
MM45T.Li KL0358 鼠肝癌細(xì)胞系 MM45T.Li細(xì)胞
H22-H8D8 KL0359 鼠肝癌細(xì)胞,H22-H8D8細(xì)胞
EAC-E2G8 KL0360 鼠腹水瘤 EAC-E2G8細(xì)胞
J774A.1 KL0361 鼠腹水單核細(xì)胞瘤 J774A.1細(xì)胞
GR KL0362 鼠成纖維細(xì)胞系 GR細(xì)胞
KL0363 噬糖鹽紅菌 ATCC29252
KL0364 嗜鹽細(xì)菌屬 DSMZ16465