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A-431[A431]人皮膚鱗癌細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)原理：將動(dòng)植物的各種組織從機(jī)體中取出，經(jīng)各種酶（常見胰蛋白酶）、整合劑（常用EDTA）或機(jī)械方法處理，分散成單細(xì)胞，置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細(xì)胞得以生存、生長和繁殖。

A-431[A431]人皮膚鱗癌細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)出現(xiàn)的問題：血清中的沉淀物對細(xì)胞培養(yǎng)有什么影響？

（1）過濾，如果血清中出現(xiàn)大量的沉淀物，血清將很難過濾。一般說來，因?yàn)樵谘迳a(chǎn)時(shí)*已經(jīng)經(jīng)過100nm或者40nm的過濾處理，并且經(jīng)過了嚴(yán)格的無菌檢測，因此HyClone不推薦再過濾用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清。在實(shí)驗(yàn)室中沒有必要再過濾處理血清，在大規(guī)模的細(xì)胞培養(yǎng)中往往將血清直接加到培養(yǎng)基中一起過濾。

（2）細(xì)胞生長，我們的試驗(yàn)以及經(jīng)驗(yàn)表明沉淀物不會(huì)影響細(xì)胞培養(yǎng)，我們的客戶以及其它血清生產(chǎn)商也證明了這一點(diǎn)。

（3）污染，磷酸鈣往往被誤認(rèn)為微生物污染而引起爭端。研究者可能會(huì)在血清中觀察到一些絮狀的沉淀，因此就會(huì)比較警覺的去做無菌試驗(yàn)，將血清放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)幾天，結(jié)果可能會(huì)觀察到更多的絮狀沉淀，因此就斷定血清被污染了。另外，也可以進(jìn)行革蘭氏染色，在油鏡下觀察，以確認(rèn)是否有污染。

A-431[A431]人皮膚鱗癌細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)分享：

☆ 各種無菌，從培養(yǎng)基到操作過程再到培養(yǎng)箱，時(shí)刻注意無菌。

　　☆培養(yǎng)基的配制一定要做好梯度摸索并詳細(xì)記錄，否則細(xì)胞死都不知道怎么死的。

　　☆ 盡量提高操作熟練度，減少培養(yǎng)皿在培養(yǎng)箱外的滯留時(shí)間，細(xì)胞很脆弱，經(jīng)不起折騰，不像人，熱了有空調(diào)，冷了能烤火。

☆把握好培養(yǎng)基更換的時(shí)間，不同細(xì)胞類型時(shí)間不同，早了浪費(fèi)試劑，晚了可能全軍覆沒。

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