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| 產(chǎn)地 | 中國/上海 |
| 品牌 | KALANG |
| 貨號 | KL71201 |
| 英文名稱 | PCRmix |
| 包裝規(guī)格 | 1支×5 |
| 純度 | 99% |
| CAS編號 | |
| 別名 | PCRmix |
| 分子式 |
產(chǎn)品組分
P2011
2×PCR Mix 1ml 1支
超純水 1ml 1支
P2012
2×PCR Mix 1ml 1支×5
超純水 1ml 1支×5
注： PCRmix廠家分含體系中包含溴酚藍(lán)、不含溴酚藍(lán)兩類。體系中包含溴酚藍(lán)的產(chǎn)品，PCR擴(kuò)增產(chǎn)物可直接電泳檢測。這兩類產(chǎn)品的擴(kuò)增性能無差異。如沒特別說明提供體系中包含溴酚藍(lán)的包裝。
保存條件
-20℃保存2年。
請勿保存于-70℃，防止反復(fù)凍融導(dǎo)致酶活降低。
產(chǎn)品說明
PCR Mix是2×濃縮的PCR擴(kuò)增預(yù)混和溶液，含有Taq DNA聚合酶、dNTPs、緩沖液等PCR擴(kuò)增必需組分（模板與引物除外）。使用時(shí)，僅需在擴(kuò)增
體系中加入模板和引物即可進(jìn)行PCR，大大簡化操作過程，縮短操作時(shí)間，降低污染（加樣次數(shù)減少）同時(shí)，由于體系內(nèi)含有增強(qiáng)劑，能夠顯著增強(qiáng)PCR擴(kuò)增的靈敏度。擴(kuò)增產(chǎn)物具有3’-dA突出端。
Taq DNA聚合酶是嗜熱性細(xì)菌Thermus aquaticus來源的熱穩(wěn)定重組型Taq DNA聚合酶，分子量為94 KD。擴(kuò)增片段的長度可達(dá)5 kb（簡單模板）。延伸速度為0.9-1.2 kb/ min（70-75 ℃）。該酶具有5’→3’聚合酶活性，無3’→5’外切酶活性。
產(chǎn)品特點(diǎn)
PCRmix廠家使用方便：僅需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR擴(kuò)增。
快速、高效：減少加樣步驟，節(jié)約時(shí)間。
可重復(fù)：降低污染和加樣錯(cuò)誤風(fēng)險(xiǎn)
產(chǎn)品用途
高通量PCR檢測。
高重復(fù)性PCR檢測。
制備TA克隆用的PCR產(chǎn)物。
活性定義
一個(gè)活性單位（U）指用活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板/引物，在72℃、30 min內(nèi)，攝入10 nmol全核苷酸所需的酶量。
質(zhì)量控制
相關(guān)測試表明無外源內(nèi)切酶或外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染；PCR方法檢測無宿主殘余DNA，能有效擴(kuò)增人基因組中的單拷貝基因；室溫放置
一周，擴(kuò)增活性無明顯改變。
2×PCR Mix(前名Taq Mix）的組分
100 mM KCl
20 mM Tris-Cl
3 mM MgCl2
0.4 mM dNTP混合物
0.1 U/μlTaq DNA聚合酶
溴酚藍(lán)等
應(yīng)用舉例
注：以下反應(yīng)舉例為50 μl標(biāo)準(zhǔn)PCR體系，僅供參考。實(shí)際PCR條件應(yīng)根據(jù)模板、引物結(jié)構(gòu)、目的片段大小加以優(yōu)化，確定*反應(yīng)條件。（Taq Mix即PCR Mix）
以λDNA為模板，擴(kuò)增1kb片段。
λ DNA（2.5 ng/μl） 1μl
Primer 1（10μM ） 2μl
Primer 2（10μM） 2μl
2×PCR Mix 25μl
dd H2O 補(bǔ)足至50μl
PCRmix廠家反應(yīng)條件
95℃ 3 min
95℃ 30 sec
55~68℃ 30 sec 30 Cycles
72℃ 1~2 min
72℃ 10min
備注：
1 建議在冰上配置PCR 反應(yīng)液后，再放入PCR儀中進(jìn)行擴(kuò)增。這有利于提高擴(kuò)增的特異性，減少非特異性擴(kuò)增，得到良好的PCR結(jié)果。
2 模板DNA推薦用量（50 μl PCR反應(yīng)體系）
人類基因組DNA 0.1 μg ---1 μg
λDNA 0.5 ng---5 ng
質(zhì)粒DNA 0.1 ng-10 ng
大腸桿菌DNA 10 ng-100 ng
Q&A
問：PCRmix廠家的反應(yīng)體系與普通Taq DNA聚合酶的反應(yīng)體系有何不同？
答：PCR Mix的反應(yīng)體系中除Taq DNA聚合酶、dNTP混合物、Mg2+等常規(guī)組分外，還包含適當(dāng)比例的PCR Enhancer與穩(wěn)定劑。而且，反應(yīng)體系中的離子種類與
濃度也有所區(qū)別。
問：為什么PCR Mix的靈敏度與擴(kuò)增效率會(huì)高于普通Taq DNA聚合酶？
答：這是由于東盛對PCR Mix反應(yīng)緩沖液中的成分與濃度進(jìn)行了優(yōu)化。我們在TaqMix反應(yīng)緩沖液中添加了適當(dāng)比例的PCR Enhancer，提高了聚合酶的熱穩(wěn)定性，
顯著降低DNA二級結(jié)構(gòu)對于PCR擴(kuò)增的影響。同時(shí)，對PCR Mix反應(yīng)緩沖液中的離子濃度與比例進(jìn)行優(yōu)化，使得聚合酶處于最適活性狀態(tài)，從而獲得了*的擴(kuò)
增效率。
問：為什么PCRmix廠家的重復(fù)性更好？
答：這是由于PCR Mix是規(guī)?；I(yè)生產(chǎn)，PCR體系組分的濃度與比例一致性好，且減少多種溶液被PCR模板污染的可能性，以及在加樣過程中人為造成的誤
差，大大提高了實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性，特別適合高通量與高重復(fù)性PCR檢測。
問：PCR Mix的擴(kuò)增產(chǎn)物能否直接進(jìn)行TA克??？
答：可以直接進(jìn)行TA克隆。
